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近日，黄超兰团队与中国科学院上海生化与细胞所许琛琦、美国加州大学圣地亚哥分�；荻鞣蛉搅衷诠恃跗诳断赴飞戏⒈砹酥匕跹芯砍晒�。该研究通过黄超兰团队开发的基于质谱的绝对定量蛋白质组新方法，揭示了T细胞受体-共受体（TCR-CD3）复合物络氨酸在不同抗原刺激下的动态磷酸化修饰全貌，发现了一条亚基CD3ε的单磷酸化新功能，增加了人们对CD3亚基功能多样性的理解。该研究成果在血液瘤和实体瘤治疗中展现出良好应用前景，也为CAR-T细胞疗法的发展提供了新的思路和指导。
说到此次合作的契机，黄超兰娓娓道来微波消解仪厂家，“ T细胞是免疫系统里的‘猎人’，它依靠T细胞受体（TCR）识别肿瘤抗原，杀伤肿瘤细胞。而TCR下面有很多条亚基，不同的抗原进来，人体就会‘招募’不同的蛋白实现不同的抵抗功能，那么招募谁关键就在于这几条亚基的络氨酸的磷酸化状况。当时许老师用讲故事的方式吸引了我，希望知道不同的抗原刺激下的TCR究竟是如何被磷酸化，谁多谁少谁快谁慢，这需要进行绝对定量检测。当时我首先被这个有趣的科研问题吸引了，于是便有了这次合作�！�
TCR中有20个磷酸化位点，分为12种不同类型，等于有212种可能，要实现对全部磷酸化位点的同时定量分析，绝非易事。因此，为了直观比较不同TCR刺激下的磷酸化模式，精确绘制出TCR所有酪氨酸磷酸化的动态过程，黄超兰团队开发了一种新颖的绝对定量方法（Targeted-IP-Multiplex-Light-Absolute-Quantitative Mass Spectrometry，TIMLAQ-MS）。微波消解仪厂家“该方法区别于目前报道的蛋白组绝对定量手段，不需要加入同位素重标的合成肽段，而是巧妙地利用串联质量标签（TMT），设计将6个标准样品和4个分析样品混合起来作为内标。标准样品为不同浓度梯度的合成非重标磷酸化/非磷酸化CD3肽和从未经抗原刺激的T细胞中通过IgG抗体免疫沉淀下来的背景蛋白的混合物。用数据依赖采集结合平行反应监测的方式获得抗原刺激下，TCR-CD3免疫沉淀复合物中不同酪氨酸位点的磷酸化/非磷酸化在不同时间点的定量结果�！盩IMLAQ成功绕过了以前的定量方法中通常使用的同位素重标记肽，既节约了成本，又有效降低了方法的复杂性和数据采集误差，进一步提高了定量准确性，最终可完全实现在一次测量中对不同时间点全部ITAM磷酸化修饰的绝对定量
